一、 精液稀釋液配制

1、 用50ml注射器從滅菌的蒸餾水瓶中抽取25ml蒸餾水；

2、 將蒸餾水注入裝有稀釋粉的玻璃瓶中，充分搖動(dòng)使稀釋粉徹底溶解，配成稀釋液基礎(chǔ)液；

3、 在裝基礎(chǔ)液的玻璃瓶蓋上扎上注射針頭后（為防止崩蓋），放入33-35℃的保溫杯中（注意保溫杯中的水不能太深，以防玻璃瓶?jī)A倒，預(yù)熱5分鐘；

4、 如需低溫保存，每瓶中加入純凈雞蛋黃液5ml，搖勻。

二、 假陰道法采精

1．假陰道的準(zhǔn)備

將清洗干凈并晾干的內(nèi)胎光滑面向內(nèi)安裝在外殼上，用橡皮圈固定兩端，然后分別用75%和95%的酒精棉球各擦拭一遍，將經(jīng)清洗烘干的集精杯夾層內(nèi)注入35℃的溫水（冬季時(shí)采用），然后安裝在假陰道的一端，用集精杯護(hù)套固定。在假陰道外殼與內(nèi)胎夾壁內(nèi)注入50～60℃熱水至一半容量（灌滿后平放使注水口處于側(cè)面位置，多余的水會(huì)流出），裝上氣閥。在假陰道外口向內(nèi)均勻涂抹紅霉素軟膏等潤(rùn)滑劑，達(dá)到內(nèi)胎的1/3～1/2，充氣后內(nèi)腔溫度應(yīng)為38.5～42℃。

2．臺(tái)羊的準(zhǔn)備

一人倒騎發(fā)情母羊，并用雙腿夾持住發(fā)情母羊的脖子，雙手扶住母羊的側(cè)腹，使其不能擺動(dòng)。

3．公羊的準(zhǔn)備

采精前，用50ml一次性注射器內(nèi)吸入35℃加有雙抗（青霉素、鏈霉素）的生理鹽水，然后與一次塑料導(dǎo)管連接。將導(dǎo)管插入公羊陰筒內(nèi)，緩緩?fù)迫肷睇}水，沖洗陰筒，最后用紙巾擦干。

4．采精

（1）采精方法

將種公羊牽到臺(tái)羊旁，采精員手持假陰道，蹲在臺(tái)羊的右后側(cè)，面向臺(tái)羊，隨時(shí)準(zhǔn)備操作。當(dāng)公羊爬上臺(tái)羊時(shí)，采精員應(yīng)迅速將假陰道外口向后上方傾斜與公羊陰莖伸出方向成一直線，用左手扶住包皮口的后方，掌心向上托住包皮使陰莖向右偏，將陰莖導(dǎo)入假陰道內(nèi)，公羊向前上一沖說(shuō)明已經(jīng)射精。公羊射精后，采精員持假陰道隨公羊后移并使集精杯一端略向下，陰莖脫出后，放氣，取下集精杯。

采用鮮精人工授精的，應(yīng)隨采隨用，用完后再采。

（2）采精頻率

公羊在發(fā)情季節(jié)，短時(shí)間內(nèi)一天可采3～4次。但連續(xù)采精的公羊，建議每周不超過(guò)6次。

三、精液的稀釋與保存

1、 精液采集后，注意觀察是否有云霧狀現(xiàn)象，如果有，可將精液用1000ul移液槍移入到一次性試管中，并根據(jù)總量作1:3等溫稀釋。即稀釋前，稀釋液要進(jìn)行預(yù)溫。

2、 精液稀釋5分鐘后應(yīng)進(jìn)行一次活力檢查，合格方可用于輸精。

3、 如果立即進(jìn)行輸精的，采用基礎(chǔ)液稀釋精液，如果在晚間和次日上午輸精，可在下午采好精并用含蛋黃的稀釋液稀釋?zhuān)缓髮⒃嚬苡眉啿及梅湃氡淅洳厥冶４娲?，或放入裝有少半杯碎冰塊的保溫杯內(nèi)保存和運(yùn)輸。

四、母羊的輸精

（一）輸精前的準(zhǔn)備

1．輸精用品和精液的準(zhǔn)備

每輸精一次用一支輸精器。輸精器每次輸精結(jié)束后應(yīng)立即用清水清洗外部，并用蒸餾水沖洗內(nèi)管和外部。根據(jù)生產(chǎn)實(shí)際需要，將5支或10支輸精器為一組，用牛皮紙包好，放入干燥箱中，100～150℃干燥1h，放涼備用。輸精前，用1ml的一次性注射器吸入少量生理鹽水或稀釋液連接在輸精器上，潤(rùn)洗輸精器內(nèi)管。接著注射器吸取0.1ml空氣后，將輸精器前端插入裝精液的容器中，吸入0.1ml精液（以活塞后退的刻度數(shù)為準(zhǔn)）。將輸精器前端略向上放在器械盤(pán)中備用，要確保輸精器前端不接觸任何物品。裝低溫保存精液的試管應(yīng)放在保溫杯中的碎冰塊上，以避免升溫。

開(kāi)膣器用前要用水清洗干凈，放在器械盤(pán)上，用紗布覆蓋，在100～150℃下干燥1h，放涼備用。一般要求每輸一只羊更換一個(gè)開(kāi)膣器。如果開(kāi)膣器較少，也可將用過(guò)的開(kāi)膣器用紙巾擦凈，用裝75%乙醇的噴瓶噴灑一遍，酒精完全揮發(fā)后使用。

2．母羊的保定和外陰消毒

母羊可保定在保定架內(nèi)。在保定架后方挖一個(gè)長(zhǎng)寬各80cm,深60cm的坑，在坑中放一張小凳子，輸精員坐在坑中的小凳上操作；也可將保定架抬高（圖2-2-24），以方便輸精操作。大型羊場(chǎng)可制作轉(zhuǎn)盤(pán)式輸精臺(tái)，母羊趕上輸精臺(tái)后，轉(zhuǎn)盤(pán)轉(zhuǎn)到輸精員坐的位置，開(kāi)始輸精，結(jié)束后，將下一個(gè)輸精位轉(zhuǎn)到面前。小型羊場(chǎng)也可用倒提保定的方法，這種方法由于母羊臀部位置抬高，更容易將精液輸入子宮頸管內(nèi)，不易發(fā)生倒流。用鑷子夾取在0.1%高錳酸鉀溶液中浸濕的棉球清潔母羊外陰，然后用消毒紙巾擦干。

（二）輸精操作

在母羊陰門(mén)裂處涂少量紅霉素軟膏或?qū)Ｓ盟詽?rùn)滑膏，也可將潤(rùn)滑劑涂在開(kāi)膣器前端，左手持開(kāi)膣器，使開(kāi)膣器的手柄向左，前端略向母羊背側(cè)方向插入母羊陰道內(nèi)，再將手柄轉(zhuǎn)向下方（母羊腹側(cè)），打開(kāi)陰道，借助自然光或燈光，找到母羊子宮頸外口。子宮頸外口及其周?chē)つこ首霞t色，比周?chē)つゎ伾?，如果陰道穹隆處黏液較多，可用輸精器將其挑到一邊，以方便找到子宮頸口。將輸精器插入子宮頸口，到不能再向里插，稍后退一點(diǎn)，以免輸精器前端被子宮頸皺褶堵塞。緩慢注入精液，當(dāng)注射器中最后的空氣推出后，可看到精液充滿了子宮頸外口，應(yīng)停止推送注射器活塞柄，抽出輸精器。

注意，開(kāi)膣器插入時(shí)，一定要輕緩，插入并開(kāi)張后，要始終用力直到抽出開(kāi)膣器，以免開(kāi)膣器閉合夾傷陰道黏膜。對(duì)處女羊，有時(shí)開(kāi)膣器不易插入，可不用開(kāi)膣器，直接將輸精器插入到陰道穹隆附近，輸精量應(yīng)增大一倍。

倒提保定時(shí)，輸完精后，可讓助手繼續(xù)倒提母羊1min，以防止精液倒流。

細(xì)管凍精容量較大（0.15～0.25ml），會(huì)有一些精液流入陰道內(nèi)，屬正?，F(xiàn)象。

（三）輸精時(shí)間和輸精要求

發(fā)現(xiàn)發(fā)情后4-8h第一次輸精，間隔8h第二次輸精。由于羊的輸精部位淺，為了防止倒流，輸精量為0.1ml），有效精子數(shù)為5000萬(wàn)個(gè)。